大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書

大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Esophagus PrimaCell: Normal Esophageal Smooth Muscle Cells】
  大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書食管是咽和胃之間的消化管。食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長(zhǎng)和心肺的下降，而逐漸增長(zhǎng)。。其中，食管平滑肌細(xì)胞是食管運(yùn)動(dòng)細(xì)胞，食團(tuán)吞咽后由咽腔進(jìn)入食管上端，食管肌肉即發(fā)生波形蠕動(dòng)，使食團(tuán)沿食管下行至胃。大鼠食管平滑肌細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。 雖然食管平滑肌組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的食管平滑肌組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的食管平滑肌能使得平滑肌組織中平滑肌細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將食管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞分離開來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠食管平滑肌細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的食管平滑肌原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。

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注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

CD20 / MS4A 抗體 (PerCP), 兔單抗 FCM    25 Test

IL8R / CD28a 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

ACAN 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

ILRL 抗體, 兔多抗 ELISA   WB    400 µg

CD5 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

IFNAR2 / IFNABR 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Endoglin / CD05 / ENG 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD47 / EMMPRIN / Basigin 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM   IF   ICC/IF   25 Test

CD20 / MS4A 抗體 (APC), 兔單抗 FCM    25 Test

CALCA / CGRP 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說(shuō)明書4--2-氯嘧分子式：29.55英文名稱：4- amino -2-：746-50-9分子量： C4H4ClN3

知母皂苷A-Ⅲ英文名稱：Timosaponin A- III分子式：740.92分子量： C39H64O3：4059-79-4

菝葜皂苷元英文名稱：Sarsasapogenin分子式：46.64分子量： C27H44O3：26-9-2

乙丙酯英文名稱：Acetic acid acrylic ester分子式：分子量：：

檳榔堿英文名稱：Arecoline分子式：236.分子量：C8H4BrNO2：300-08-3

4-(2-代乙酰)-2,2,6,6-四甲--氧自由分子式：339.2英文名稱：4- (2- iodobenzofuran carbamoylmethyl) -2,2,6,6- four -- methyl piperidine oxygen radicals：2573-24-0分子量： CH20IN2O2

分子式：246.74英文名稱：Hydrochloric acid naphthalene：550-99-2分子量： C4H5ClN2

2,5-二氯-3-硝吡分子式：92.98英文名稱：2,5- two -3- nitro pyridine：2427-62-3分子量： C5H2Cl2N2O2

氯-乙酯甲-3-甲咪唑分子式：204.65英文名稱：Chlorinated - ethyl methyl -3-：分子量： C8H3ClN2O2

2-氯吡分子式：3.55英文名稱：2- chloride：09-09-分子量： C5H4ClN