小鼠水通道蛋白9（AQP-9）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存

小鼠水通道蛋白9(AQP-9)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可向客服索取說(shuō)明書(shū)》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

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產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠水通道蛋白9(AQP-9)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱(chēng)： AQP-9 ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
存儲(chǔ)條件：2-8℃
有效期：6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床 。

小鼠水通道蛋白9(AQP-9)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類(lèi)型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標(biāo)記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測(cè)抗體、
（四）競(jìng)爭(zhēng)法。
小鼠水通道蛋白9(AQP-9)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽(yáng)性。

BNIP3L    重組人 BNIP3L 蛋白    BNIP3L
LSAMP    重組人 LSAMP 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    LSAMP
SRGN    重組人 Serglycin / SRGN 蛋白 (His & Myc 標(biāo)簽)    SRGN
NRP    重組人 Neuropilin- / NRP / CD304 蛋白 (His 標(biāo)簽)    NRP
OSM    重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)    OSM
KDR    重組人 VEGFR2 / Flk- / CD309 / KDR 蛋白 (His 標(biāo)簽)    KDR
CLECB    重組人 CLECB / CLEC2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CLECB
LAIR2    重組人 LAIR2 / CD306 蛋白    LAIR2
ISG5    重組人 ISG5 / GP2 蛋白    ISG5
HNMT    重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    HNMT
ULBP2    重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    ULBP2
ULBP2    重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    ULBP2
HGF    重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白    HGF
LGALS8    重組人 Galectin-8 / LGALS8 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    LGALS8Protein A 瓊脂糖    mL    
30648-200    Afu -DNA 糖基化酶    200U
30995-25    Cy3-dCTP 溶液，0mM    25μL
TBE 電泳液 ,0×    250mL    
碘    5g    
親和硅烷     25mL    
海腎熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒    00 次    
3087-00    堿性磷酸酶標(biāo)記親和素    00mg
90702-20    即用型長(zhǎng)片段 PCR 試劑盒    20 次
小鼠水通道蛋白9(AQP-9)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存脫氧膽酸    0g    
放線菌素 D    mg    
馬來(lái)酸    00g    
T4 RNA 連接酶 2( 雙鏈 RNA 連接酶 )    50U    
CAS9005-82-7    直鏈淀粉    250mg
2052-20    即用型藍(lán)白 T 載體 B 型 (T7-T3, 有 MCS)    20 次
線狀 DNA 清除劑    30 次    
骨骼肌細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL    
次甲基綠    g