豬粘蛋白/粘液素5AC（MUC5AC）酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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產(chǎn)品名稱：豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱： MUC5AC ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
存儲(chǔ)條件：2-8℃
有效期：6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍：此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn)，禁用于臨床 。

豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：
①固相的抗原或抗體，
②酶標(biāo)記的抗原或抗體，
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
（一）雙抗體夾心法、
（二）一步法、
（三）間接法測抗體、
（四）競爭法。
豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍，即為陽性。

QO    重組人 NQO / DT-diaphorase 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® SacI
NMNAT    重組人 NMNAT / NMNAT 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® TaiI
SPOCK    重組人 SPOCK / Testican 蛋白 (aa 2-429, His 標(biāo)簽)    FastDigest® NlaIV (BspLI)
NAA0    重組人 NAA0 / ARDA 蛋白    FastDigest® SfcI (BfmI)
TNFRSF8    重組人 GITR / TNFRSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    FastDigest® Bpu0I
GPNMB    重組人 GPNMB / Osteoactivin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    FastDigest® SbfI (SdaI)
CD27    重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® BslI (BseLI)
DCBLD    重組人 Discoidin / DCBLD 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® MscI (MlsI)
KLHL2    重組人 KLHL2 蛋白 (GST 標(biāo)簽)    FastDigest® FspI (NsbI)
FHIT    重組人 Fragile histidine triad / FHIT 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® DraIII (AdeI)
TPPP3    重組人 TPPP3 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® SwaI (SmiI)
PFDN2    重組人 PFD2 / PFDN2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® SpeI (BcuI)
SUB    重組人 SUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® SpeI (BcuI)
RYBP    重組人 APAP- / AAP / RYBP 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    FastDigest® BsrDI (BseMI)
DARS    重組人 DARS 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® BsrBI (MbiI)
TBCB    重組人 TBCB 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® BspHI (PagI)
ESD    重組人 Esterase D / ESD 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® TatI
LSM    重組人 LSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FastDigest® EcoNI (XagI)2-26    XL-0 gold 菌種    mL
一管式 DNA 膠回收試劑盒    00 次    
即用型 PCR 試劑盒 3.0     mL    
L-     25g    
動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 6    00 次    
CAS367-93-    異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷    g
9203-00    一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒    00 次
玉米蛋白    25g    
KM7 酵母菌種    mL    
甲基綠    g    
Tth 核酸內(nèi)切酶 IV    500U    
豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格CAS83-86-3    植酸    00mL
8085-500    BCA 法蛋白定量試劑盒    500 次
柱式病毒 DNAout    50 次    
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素    2mg    
核糖核酸酶 B    00mg    
魯米諾血跡鑒定試劑盒    00mL    
CAS59-02-9    維生素 E    5g
40436-250    非蛋白型 Western 封堵液    250mL