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              技術(shù)文章

              豚鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒操作步驟
              點擊次數(shù):1075 更新時間:2020-04-09

              豚鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(elisa)。往預(yù)先包被豚鼠α干擾素(IFN-α)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的豚鼠α干擾素(IFN-α)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
               操作步驟
              .從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
              2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
              3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
              4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體00μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
              5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
              6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
              7.每孔加入終止液50μL,5min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
               

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